DNA亲子鉴定中的PCR技术

　　DNA亲子鉴定中的PCR技术：

　　PCR技术常与别的技术结合在一起应用，如RT-PCR、竞争PCR、巢式PCR、RAPf)、ARDRA等。

　　优势：RT-PCR不但能检验出不可以培养的微生物的基因，还能精确测量mRNA基因的转录水平。

　　一、反应特性：特异性强PCR反应的特异性决策要素为:

　　①引物与模板DNA特异正确的结合

　　②碱基配对标准

　　③TaqDNA聚合酶生成反应的忠实性

　　④靶基因的特异性与单纯性

　　二、反应标准：标准的PCR反应管理体系:

　　(1)10×扩增缓冲液10ul

　　(2)4种dNTP化合物各200umol/L

　　(3)引物各10~100pmol

　　(4)模板DNA0.1~2ug

　　(5)TaqDNA聚合酶2.5u

　　(6)Mg2+1.5mmol/L

　　(7)加双或三蒸水至100ul

　　PCR反应五因素:参加PCR反应的化学物质关键有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+