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DNA亲子鉴定中的PCR技术

来源:未知2019-12-28 在线咨询

  DNA亲子鉴定中的PCR技术:  PCR技术常与别的技术结合在一起应用,如RT-PCR、竞争PCR、巢式PCR、RAPf)、ARDRA等。  优势:RT-PCR不但能检验出不可以培养的微生物的基因,还能精确测量mRNA基因的转录水平。  一、反应特性:特异性强PCR反应的特异性决策要素为:  ①引物与模板DNA特异正确的结合  ②碱基配对标准  ③TaqDNA聚合酶生成反应的忠实性  ④靶基因的特异性与单纯性  二、反应标准:标准的PCR反应管理体系:  (1)10×扩增缓冲液10ul  (2)4种dNTP化合物各200umol/L  (3)引物各10~100pmol  (4)模板DNA0.1~2ug  (5)TaqDNA聚合酶2.5u  (6)Mg2+1.5mmol/L  (7)加双或三蒸水至100ul  PCR反应五因素:参加PCR反应的化学物质关键有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
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